产品货号：
SN0043
中文名称：
2×BB Taq PCR Mix(PAGE电泳检测)
英文名称：
2×BB Taq PCR Mix For PAGE
产品规格：
5mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
使用方法：
常见问题：
相关搜索：2×BB Taq PCR Mix(PAGE电泳检测)，聚丙烯酰胺电泳检测，PCR扩增，PCR预混液，2×BB Taq PCR Mix For PAGE
本制品包含高纯度BB Taq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系，浓度为2×，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增，适用于常规PCR及较短DNA片段的PCR扩增，专用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测。使用本制品扩增的PCR产物3'端带有一个突出的"A"碱基，纯化后可直接用于TA克隆。本制品使用简单，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增。本制品适用于常规PCR扩增及较短DNA片段的PCR扩增，专用于聚丙烯酰胺电泳检测。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| 2×BB Taq PCR Mix(PAGE电泳检测) | 1mL×5 |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
- 请使用高质量的模板进行扩增。
- PCR Mix应避免反复冻融，短期内多次使用可置于4℃保存。
使用方法：
- 按下表配制PCR反应体系（冰上操作）
成分 25μL体系 50μL体系 终浓度 2×BB Taq PCR Mix(PAGE电泳检测) 12.5μL 25μL 1× 引物1 (10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 引物2 (10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 模板DNA 根据反应需要加入合适的量 ddH2O 至25μL 至50μL - 引物终浓度范围为0.2～1μM，推荐0.4μM，过少的引物会导致扩增失败或产量极低，过量的引物会增加错配的可能性，导致非特异性扩增；
- 模板推荐量：
基因组DNA：10～1000ng；
质粒DNA：1～50ng。
- 引物终浓度范围为0.2～1μM，推荐0.4μM，过少的引物会导致扩增失败或产量极低，过量的引物会增加错配的可能性，导致非特异性扩增；
- 建议的PCR条件
步骤 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 5min 1 变性 94℃ 20s 30～35 退火 50～60℃ 20s 延伸 72℃ 60s/kb 终延伸 72℃ 5min 1 - 4℃ Hold -
常见问题：
- 扩增无产物或产物量少？
- 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板；
- 模板浓度过低。适当增加模板用量；
- 引物不合适。优化引物设计；
- 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度；
- 循环数过少。适当增加5～10个循环；
- 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至20～30s/kb。
- 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板；
- 扩增出现非特异条带或弥散带？
- 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增；
- 引物浓度过高。降低引物浓度；
- 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板；
- 退火温度过低。适当提高退火温度或使用Touchdown PCR程序；
- 循环数过多。减少循环数至25～30个循环。
- 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增；
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